W sztuce Makbet Lady Makbet odgrywa kluczową rolę w śmierci króla Dunkana. To ona przekonuje Makbeta do zamordowania króla, pomaga mu zaplanować i przeprowadzić ten czyn.
Po tym, jak Makbet wyraża swoje wątpliwości i obawy przed zabiciem króla, Lady Makbet krytykuje go za bycie tchórzem i zawstydza go do popełnienia zbrodni. Zwraca uwagę, że miał już pomysł zabicia Duncana i waha się tylko ze względu na swoją „słabą naturę”. Przypomina mu również o jego ambicjach zostania królem i mówi mu, że musi być bezwzględny, jeśli chce osiągnąć swoje cele.
Determinacja i manipulacje Lady Makbet ostatecznie przekonują Makbeta, aby zgodził się na jej plan. Ona przedstawia szczegóły morderstwa, w tym, jak i kiedy należy to zrobić. Mówi także Makbetowi, aby zostawił zakrwawione sztylety przy ciele Duncana, aby wina spadła na straż królewską.
Po popełnieniu morderstwa Lady Makbet początkowo jest pewna, że uda im się to zatuszować. Jednak wkrótce zaczyna wykazywać oznaki winy i szaleństwa. Ma obsesję na punkcie krwi na rękach i nie może spać. Zaczyna też mieć wizje ducha Duncana, który oskarża ją o morderstwo.
Poczucie winy Lady Makbet w końcu staje się dla niej nie do zniesienia. Ona umiera w czwartym akcie sztuki, a jej śmierć jest punktem zwrotnym dla Makbeta. Staje się jeszcze bardziej bezwzględny i tyrański, aż w końcu traci rozum.
Rola Lady Makbet w śmierci króla Dunkana jest znacząca, ponieważ podkreśla siłę ambicji i niebezpieczeństwa, jakie niesie ze sobą dopuszczenie, aby pragnienia przezwyciężyły zasady moralne. To złożona i tragiczna postać, którą ostatecznie niszczą własne ambicje i poczucie winy.