Podczas swojej podróży Despereaux zaprzyjaźnia się z mądrym szczurem imieniem Chiaroscuro, ludzką służącą imieniem Miggery Sow i niewidomą dziewczyną imieniem Antonia. Światłocień pomaga Despereauxowi zrozumieć jego prawdziwy cel i zachęca go do odwagi. Miggery Sow pomaga Despereauxowi poruszać się po ludzkim świecie i udziela mu cennych rad. Antonia, która ma silną więź ze zwierzętami, zostaje bliską przyjaciółką Despereaux i wspiera go w jego poszukiwaniach.
Despereaux, Chiaroscuro, Miggery i Antonia wyruszają razem na niebezpieczną przygodę, aby uratować księżniczkę i zaprowadzić pokój między myszami i szczurami. Po drodze napotykają wiele wyzwań i przeszkód, ale ich determinacja i lojalność pomagają im pokonać wszelkie przeciwności losu.
„Opowieść o Despereaux” to podnosząca na duchu i inspirująca opowieść o przyjaźni, odwadze i akceptacji własnej tożsamości. Podkreśla znaczenie bycia innym, ponieważ często to nasze wyjątkowe cechy czynią nas wyjątkowymi i zdolnymi do wielkich rzeczy.