- Żona Horatio Caine'a, Marina, grana przez Sofię Milos: Marina Caim była żoną Horatio we wczesnych sezonach serialu. Pierwotnie była prywatnym detektywem, który pomagał Horatio w niektórych sprawach. Jednak ich małżeństwo ostatecznie się rozpadło z powodu oddania Horatio swojej pracy.
- Calleigh Duquesne, grana przez Emily Procter: Calleigh Duquesne to śledcza CSI poziomu 3 i córka funkcjonariusza policji z Miami. Jest wykwalifikowanym specjalistą medycyny sądowej i jest znana ze swojej wiedzy specjalistycznej w zakresie analizy DNA i identyfikacji broni palnej.
- Natalia Boa Vista, grana przez Evę LaRue: Natalia Boa Vista dołącza do zespołu w sezonie 5 jako CSI poziomu 2. Jest byłą tajną funkcjonariuszką policji i ma doświadczenie w psychologii, co pomaga jej zrozumieć motywacje przestępców.
- Żona Delko, Marisol Delko, grana przez Elizabeth Berkley Lauren: Marisol Delko jest żoną Erica Delko. Pobierają się w finale sezonu 4. Marisol pracuje także jako detektyw z wydziału zabójstw w Miami.
- Yelina Salas, grana przez Sofię Vassilievę: Yelina Salas dołącza do zespołu w sezonie 9. Jest córką rosyjskiego gangstera i ma wiedzę na temat wewnętrznego funkcjonowania organizacji przestępczych.