żelu poliakrylamidowym jest przygotowany z gniazd w nim. Żel utworzony przez wylanie gorącego ciekłego roztworu poliakryloamidu do płytkiej pudełka. Pojemnik powinien zawierać strukturę comblike z zębami , które wskazują się do roztworu. Poliakryloamid się żel szybko po jego wylaniu igrzebienia usuwa się ujawnić prostokątne otwory .
Sodowy siarczan dodecylu (SDS )
białko jest traktowany dodecylosiarczanu sodu (SDS ), w celu denaturacji podjednostek dużego białka, dzięki czemu każdy z nich może być mierzone odrębnie . Zalety tego są takie, że wSDS dajepolipeptydy ładunek ujemny, więc będą migrować w kierunku ujemnym końcu lub anody, z żelu. Po drugie ,sprawia , że wszystkie SDS podjednostek będą miały taką samą opłatę , a zatem wszyscy migrują w żelu w zależności od ich mas cząsteczkowych , a nie opłat .
Dodanie białka
niewielka ilość DNA lub białka jest umieszczony w jednym z prostokątnych otworów w jednym końcu żelu. Prąd elektryczny jest uruchamiany za pomocą żelu przy obojętnym pH. Około 10 mikrolitrów drabinki DNA , jak również dwa elementy sterujące są również ładowane do żelu . Drabinka DNA jest stosowany w celu umożliwienia pomiaru w jakimpróbki porusza się w procesie elektroforezy .
Elektroforezy
maszyna zostaje włączony do 100 woltów i pozwolić przepuszczano przez 30 minut. Po elektroforezie próbek były przez 30 minutżel wraz z zasobnika są usuwane i umieszczane w barwiącym na około trzy minuty. Jest to następnie umieszczając żelu ciepłą wodą przez pięć minut. Żel jest gotowy do umieszczenia w polu światła w celu obserwacji ruchu fragmentów DNA .
Inne względy
Podczas wyświetlania żel pod światło niektóre ważne rzeczy powinny być brane pod uwagę . Komórki mogą być homozygotyczne lub heterozygotyczne pod względem genu , zależnie od tego, czykopia jest obecne lub nieobecne w obu kopii albo w jednym. Heterozygotyczne wynik może pojawić się jako pojedynczy zespół, ponieważ segmenty DNA, które są wzmacniane bardziej efektywnie ciemniejsze w żelu. Barwnik jest również dodane , tak każdy polipeptyd można zobaczyć zarówno podczas jak i po elektroforezie .